Erstens wollte Jeff Rowe erzählen, dass die Besetzung seiner vier Hauptdarsteller ein enorm langer Prozess war und dass er und die Casting-Agenten des Films Hunderten von Stimmen zugehört hatten, bevor sie sich schließlich für die Schauspieler entschieden hatten. Das Studio wollte vielleicht ganz natürlich finanzierbare, bekannte Stars in die Hauptrollen einbeziehen, was Rowe definitiv nicht wollte. Glücklicherweise gab es ein Dutzend anderer Nebendarsteller, die den Studioauftrag erfüllen konnten. Rowe sagte:
“[D]Die Besetzung des Films war davon abhängig, echte Teenager für die Rollen zu besetzen, und ich glaube, es wurde schon sehr früh klar, dass es sich dabei um vier unbekannte Schauspieler handeln würde. Wir werden eine große Casting-Suche durchführen. Wir haben mit Rich Delia zusammengearbeitet, die darin so gut war und uns Hunderte von Leuten gebracht hat, und wir haben Nick, Brady, Micah und Shamon gefunden, die alle großartig sind. Aber ich denke, darüber hinaus wollte das Studio einige Namen und eine gewisse Marktfähigkeit haben, also haben wir bei allen anderen Rollen größere Ausmaße angenommen.“
Zur Besetzung gehören außerdem Jackie Chan als mutierte Ratte Splinter und Ice Cube als Bösewicht des Films. Rose Bryne, Paul Rudd, John Cena, Hannibal Burress, Giancarlo Esposito, Post Malone, Maya Rudolph und Produzent/Co-Drehbuchautor Seth Rogen treten alle in kleineren Rollen auf, viele von ihnen spielen zusätzliche mutierte Tiere.
Nachdem dies geklärt war, befasste sich Rowe mit der potenziellen Krise, in der Cantu, Noon, Brown und Abbey tiefere Stimmen entwickeln könnten. Rowe war nicht besorgt, da er wusste, dass die Pubertät einem Kind grausame Streiche spielen kann und dass das körperliche Wachstum manchmal unvorhersehbar ist.